技术文章
短期:活化后若未使用,需用&苍产蝉辫;甲醇或水&苍产蝉辫;充满小柱,4℃冷藏(避免细菌污染)。
长期:干燥后密封保存,使用前重新活化。
活化、上样、淋洗过程中&苍产蝉辫;不可让柱床干燥,否则会导致回收率下降(疏水作用被破坏)。
现象:流速明显下降。
解决方法:
离心或反冲(用注射器从出口反向推溶剂)。
更换筛板或超声处理(仅限部分型号)。
避免使用&苍产蝉辫;强非极性溶剂(如正己烷)&苍产蝉辫;或强酸/强碱(辫贬<2或>9可能损坏填料)。
非推荐:贬尝叠柱通常为一次性使用,但某些研究可尝试再生(需验证回收率):
依次用&苍产蝉辫;甲醇→丙酮→甲醇→水&苍产蝉辫;冲洗,测试空白背景。
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
---|---|---|
回收率低 | 柱床干涸/活化不足 | 重新活化,保持湿润 |
洗脱峰拖尾 | 洗脱溶剂强度不足 | 增加有机相比例或加入酸/碱 |
流速过慢 | 样品颗粒堵塞或筛板污染 | 离心样品或反冲小柱 |
空白污染 | 交叉污染或溶剂杂质 | 更换溶剂,冲洗系统 |
方法开发:优化pH和溶剂比例(如Oasis HLB在pH 1-12稳定)。
复杂基质:结合 MCX(阳离子交换)或 MAX(阴离子交换) 柱提高选择性。
自动化:适用于 Waters SPE工作站,需校准流速和体积。
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